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酶標(biāo)板的三種分類各用什么不同呢

      高結(jié)合力酶標(biāo)板
      酶標(biāo)板經(jīng)表面處理后蛋白結(jié)合能力大大増強(qiáng),可達(dá)300-400ng 1gG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標(biāo)板可提高敏(感)性,并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無(wú)法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑  。
      中結(jié)合力酶標(biāo)板
      酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與白結(jié)合,適合作為分子量20D的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結(jié)合能力為200-300 ng 1gG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降(低)潛在的非特異性交又反應(yīng)。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
      氨基化酶標(biāo)板
      醇標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由殺水鍵取代。該類酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過(guò)離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過(guò)其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的能力,可用于固定溶于 Triton-100、 Tween20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降(低)了疏水性,一部分蛋白分子無(wú)法結(jié)合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價(jià)的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中功能基團(tuán)發(fā)生作用。
      酶標(biāo)板的材質(zhì)一般為聚苯乙烯(PS),表面能比較低,親水性很差,經(jīng)低溫等離子體接枝處理后,能在基體表面引入醛基、氨基、環(huán)氧基等活性官能團(tuán),提高基體表面的浸潤(rùn)性、表面能,使酶牢牢地固定在載體上面,提高酶的固定性。

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